關(guān)節(jié)炎模型制備

背景簡介：

關(guān)節(jié)炎與人類風(fēng)濕病關(guān)節(jié)炎具有共同的免疫學(xué)和病理學(xué)特征，因此CIA模型被廣泛應(yīng)用于研究致病機(jī)理及治療方法的研究。膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（CIA）是用Ⅱ型膠原免疫Wistar(遠(yuǎn)親雜交)、Sprague-Dawley (遠(yuǎn)親雜交)和Wistar-Lewis (近交) 中誘導(dǎo)成功。由于此CIA模型具有與人風(fēng)濕病關(guān)節(jié)炎（RA）相同的免疫和病理特征，因此該模型先后擴(kuò)展到小鼠及非人靈長類動(dòng)物，并已作為人類關(guān)節(jié)炎研究的廣泛應(yīng)用的模型。然而，對(duì)于CIA模型來說，不同種屬動(dòng)物之間是有差異的。小鼠對(duì)CIA的敏感性與主要組織相容性復(fù)合體（MHC）相關(guān)，在小鼠品系中只有DBA/1(H-2q)和B10.RⅢ(H-2r)兩個(gè)品系對(duì)CIA敏感。大鼠對(duì)CIA的敏感性也與MHC相關(guān)，并與小鼠相比具有較寬的品系范圍。因此，不同MHC型的不同品系的大鼠，盡管關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率、嚴(yán)重程度及抗體和T-cell 的特異性在不同品系間不同，但都能夠誘發(fā)關(guān)節(jié)炎。

操作流程：

1)小鼠CIA模型（膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎）

初次免疫：II型膠原&CFA佐劑CFA（佐劑濃度依小鼠品系而定）配成的乳劑尾根部皮下100ul。

加強(qiáng)免疫：7天或21天后，II型膠原& IFA佐劑IFA配成的乳劑尾根部皮下100ul。 4周左右發(fā)病，6-8周發(fā)病率達(dá)到高峰

2）大鼠CIA模型（膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎）

初次免疫：II型膠原&IFA佐劑IFA配成的乳劑配成的乳劑尾根部皮下200ul。

加強(qiáng)免疫：7天或21天后，II型膠原& IFA佐劑IFA配成的乳劑尾根部皮下100ul。

2-3周左右發(fā)病，3周后發(fā)病率達(dá)到高峰。

2）  小鼠CAIA模型（膠原抗體誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎）

方案A: 易感品系：DBA/1, Balb/c

0天：小鼠尾靜脈或腹腔注射1.5mg 5克隆合劑。

3天：小鼠腹腔注射25-50ug LPS

方案B: 鈍感品系：C57BL/6 or C57BL/6

0天：小鼠尾靜脈或腹腔注射5mg 克隆合劑。

3天：小鼠腹腔注射25-50ug LPS

注意：3-4天可誘發(fā)關(guān)節(jié)炎，7-10天達(dá)高峰期。10-14天可免疫LPS 加重炎癥反應(yīng)程度。

方案C: DBA/1 and Balb/c mice(不加LPS)

0天：小鼠尾靜脈或腹腔注射6-10mg

注意：2-3天可誘發(fā)關(guān)節(jié)炎

3)大鼠AIA 模型（佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎）

尾根部皮下免疫0.05ml CFA佐劑(cat#7027 10 mg/ml)。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是能夠使4只爪子都發(fā)生腫脹。

免疫后12-14天在爪子發(fā)生腫脹，關(guān)節(jié)炎會(huì)持續(xù)20-25天。

注：如果用（cat#7024 20 mg/ml）佐劑免疫，注射體積應(yīng)降低一半。

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